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    上海长方光学仪器有限公司

    山东市监局发布《疫病净化技术规范 荧光RT-PCR检测法》

    2019-08-09 13:51:07  来源:监督管理局 浏览量:428次
    【导读】疫病净化,根据特定疫病的流行病学调查结果和疫病监测结果,采取一系列措施,及时发现并淘汰各种形式的感染动物,达到消灭和清除传染源的过程。

          本标准规定了种猪场猪瘟净化的检测方法与判定标准、净化群的建立、净化群的维持和综合生物安全措施。

          耗材:1、离心管;2、PCR薄壁管;3、酶标板,移液器吸头。

      检测仪器:

      1、荧光PCR检测仪;              2、PCR仪和凝胶成像系统;

      3、高速台式冷冻离心机;       4、组织研磨器或者研钵。

      5、微量移液器;    6、酶标仪;     ;7、恒温箱;    8、高压灭菌锅。

      试剂

      1、无水乙醇,-20 ℃预冷。

      2、75 %乙醇,无水乙醇和双蒸水配制,-20 ℃预冷。

      3、dNTPs:含dATP、dGTP、dCTP、dTTP各10 mmol/L,-20 ℃保存,避免反复冻融。

      4、普通PCR引物参照GB/T 16551。

      5、荧光PCR引物和探针参照GB/T 27540。

      6、酶标检测试剂 等效采用GB/T 34729商品化试剂盒。

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      采样准备:

      扁桃体采样器、灭菌0.5 mL离心管、灭菌棉签或牙签、3 % NaOH溶液、手电筒、记号笔、采样记录表等。

      采样器械应用3 % NaOH 溶液消毒处理,并用水清洗干净后再采下一份,防止交叉感染。

      抗体检测:

      依据GB/T 34729执行。按照等效商品化试剂盒说明书操作并判定结果。优先使用猪瘟病毒抗体阻断ELISA试剂盒检测猪瘟抗体。

      日常监测:

      每年对净化猪群进行2次抽检。每次采集扁桃体和血清样品,抽样比例参考表A.1。置信度95 %,预期流行率3 %。检测方法按及执行。


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    2019-08-09 13:51:07
    标签:荧光PCR检测仪 , 凝胶成像系统 , 冻离心机 , 高压灭菌锅 , 酶标仪
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