分子杂交仪原理、结构、分类及操作规程-葡京娱乐场APP - 葡京娱乐场APP_葡京娱乐场官网下载app下载_澳门新葡亰手机版登录网址

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    中国葡京娱乐场APP 中国葡京娱乐场APP 分子杂交仪

    分子杂交仪

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    分子杂交仪又称分子杂交炉、分子杂交箱,是采用核酸分子杂交技术检测待测基因组中是否含有已知基因序列的设备。其可替代塑料杂交袋和水浴摇床,从而避免杂交袋破损带来的污染危险,具有微机控温精确,炉内空气循环装置设计独特,升温速度快等特点。广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的检测和遗传病的基因诊断等方面。

    分子杂交仪
    分子杂交仪结构和分类

    分子杂交仪结构和分类

    分子杂交仪,又被叫做分子杂交箱或者分子杂交炉,是通过核酸分子杂交技术对是否有已知基因序列存在于待测基因组中进行检测的设备。其在遗传病的基因诊断、基因组中特定基因...[查看全部]

    DNA分子杂交技术介绍和类比分析

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    DNA分子具有互补碱基序列,能够通过碱基对使氢键等形成,从而使稳定的双链区形成为DNA分子杂交的基础。


    杂交技术介绍

    杂交是指互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对使稳定的杂合双链分子DNA分子形成的过程。杂交过程特异性非常的高,能够采用所使用的探针已知序列检测特异性的靶序列。待检测的核酸和所使用探针为杂交的双方,该检测对象既能够为细胞总DNA或总RNA,也能够为克隆化的基因组DNA。按照使用方法,待检测的核酸既能够在细胞内杂交也能够是提纯的。探针必须经过标记,为检测与示踪提供便利,同位素为最常用的探针标记物,然而因为同位素可能发生泄漏,因此,这些年来,有许多非同位素标记探针的方法被发展出来。


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    核酸分子杂交的特异性和灵敏度均非常的高,所以其在遗传病的基因诊断、基因组中特定基因序列的检测、酶切图谱的制作和克隆基因的筛选等方面得到广泛地应用。其不但广泛应用于分子生物学领域,其在在临床诊断上的应用也越来越广泛。


    类比分析

    为了方便理解,打个比方,将宿主DNA(一般做克隆是有很多宿主DNA)看成很多还没装锁的“门”,将插入宿主DNA上(或替换掉一段序列)的目的基因看成一把特定的“锁”,而能开那把锁唯一的“钥匙”就是这个基因探针。若某个“门”能够使用“钥匙”将其打开,则表示这个“门”已经有“锁”了。也就是若杂交信号可以被检测到,则表示在宿主DNA上已经存在目的基因。


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    分子杂交仪的原理和特点

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    分子杂交仪又被叫做分子杂交箱或者分子杂交炉。由于实验的需求不一样,因此有不同规格型号的分子杂交仪可供选择。它是现代实验室采用杂交技术的理想设备,能够将塑料杂交袋和水浴摇床替代掉,从而使杂交袋破损带来的污染危险得以避免。杂交炉的特点分别为较快的升温速度,独特的炉内空气循环装置设计以及精确的微机控温。


    原理

    按照碱基互补配对原则,使用标记的已知DNA或RNA片段(探针)在一定条件下对样本中是否有待测的核酸序列进行检测的技术,即为核酸分子杂交技术。


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    在生理条件下,DNA呈现稳定的双链螺旋结构。在体外,当存在如温度超过65℃、含胺或极端pH等变性因素时,DNA分子内部的氢键断裂,解离成两条单链DNA,这种现象叫做变性。在将变性因素消除以后,单链DNA通过碱基互补使稳定的双链螺旋结构重新结合成,该过程叫做复性或退火。


    在复性过程中,如果有和样本核酸某部分序列高度同源或相同的寡核苷酸(一般为17~45个碱基)或外源性单链DNA片段,那么两者能够通过互补碱基使杂交体形成,也就是双链DNA分子,该过程叫做杂交。在复性的DNA中加入一段已知的DNA片段,如果有双链分子结合成,那么表明有已知的DNA序列存在于样本中。


    核酸分子杂交不但能够在DNA与DNA之间发生,还能够在在RNA与RNA或者RNA与DNA之间发生,分别生成DNA-DNA、 RNA-RNA或 RNA-DNA的双链结构的杂交体。


    特点

    1.分子杂交是现代实验室采用杂交技术的理想设备,能够将塑料杂交袋和水浴摇床替代掉,从而使杂交袋破损带来的污染危险得以避免。


    2.杂交炉的特点分别为较快的升温速度,独特的炉内空气循环装置设计以及精确的微机控温。


    3.温度控制采用数字PID技术,输岀采用PWM方式,具有稳定的性能,能够精确的控温,并且设有超温保护装置。


    4.能够将酶标板或试剂托盘的摆动速度、滚动式瓶架旋转速度和箱内控温温度同时显示出来。


    5.能够 在设定范围

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    分子杂交仪结构和分类

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    分子杂交仪,又被叫做分子杂交箱或者分子杂交炉,是通过核酸分子杂交技术对是否有已知基因序列存在于待测基因组中进行检测的设备。其在遗传病的基因诊断、基因组中特定基因序列的检测、酶切图谱的制作和克隆基因的筛选等方面得到广泛地应用。


    结构

    电脑控制系统、隔膜、杂交管、摇床、离心管转架或杂交瓶转架以及箱体共同构成分子杂交仪,由于分子杂交仪的型号差异,其箱体所容纳的平板数、载玻片数微孔版数、管子数也不一样。


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    分类

    根据自动化程度,分子杂交仪包括全自动分子杂交仪、半自动分子杂交仪和普通分子杂交仪。

    1.全自动分子杂交仪

    目前,全自动分子杂交仪在基因芯片产品方面被使用,其能够使杂交过程不需要人工参与,使整个杂交过程的自动化得以实现。在特定温度条件下,基因组DNA与芯片上特异的DNA探针发生反应,然后进行杂交、洗膜、孵育、显色等,从而使检测结果获得,全自动分子杂交仪自动完成上述所有过程。


    2.半自动分子杂交仪

    半自动分子杂交仪不但可以控制杂交过程中的各种参数,而且还可以在人工参与下完成杂交后的如孵育、显色等其他实验步骤。


    3.普通分子杂交仪

    普通分子杂交仪结构通常为封闭式恒温箱式,此外加上振荡或旋转式可动机构,温度控制、转速等实验参数的控制和调整由控制系统来实现。


    按照实验的需求,可以将分子杂交仪以下6类:

    1. 微孔板原位杂交仪。

    2. 载玻片原位杂交和平板杂交仪。

    3.Western杂交仪。

    4.用于大容量的分子杂交仪。

    5.用于 Southern或者 Northern技术点杂交的杂交仪。

    6. 用于小容量的核酸杂交仪。

    7. 微孔板原位杂交仪。


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    分子杂交炉技术参数和特征

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    分子杂交炉是提供DNA分子杂交一种仪器设备,DNA分子具有互补碱基序列,能够通过碱基对使氢键等形成,从而使稳定的双链区形成为DNA分子杂交的基础。


    在进行DNA分子杂交之前,首先必须从细胞中提取两种生物的DNA分子,再采用加热或提高pH的方法,使双链DNA分子分离成为单链,这个过程叫做变性。之后,杂交两种生物的DNA单链,先用同位素标记其中一种生物的DNA单链,若有互补的部分存在于两种生物DNA分子之间,那么双链区就能形成。因为同位素被检出的灵敏度高,所以其可以检测出两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区。


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    技术参数

    功率:小于600瓦特。

    电源电压:220伏特。

    杂交瓶规格:¢35×220mm

    连续工作时间:24小时。

    温度平衡时间:小于20分钟。

    温度显示分辨率:0.1摄氏度。

    温度均匀性误差:±0.03摄氏度。

    控温精度±0.5摄氏度。

    温度范围:室温+5-100摄氏度。

    旋转速度:产品型号不同,旋转速度也存在差异。


    特征

    仪器结构采用模块化设计,具有新颖的外观,稳定的温度控制,简单可靠的操作,稳定的转速,外界的电源电压不对其产生影响。在连续旋转的杂交瓶内进行杂交的过程。膜与探针混合完全,使放射同位素的泄漏和杂交袋的繁琐封装得以彻底的避免。该仪器工作室具有防辐射功能,六只杂交管能够一次装上。


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    分子杂交仪操作规程和注意事项

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    分子杂交仪,又被叫做分子杂交箱或者分子杂交炉,其在遗传病的基因诊断、基因组中特定基因序列的检测、酶切图谱的制作和克隆基因的筛选等方面得到广泛地应用。其不但广泛应用于分子生物学领域,其在在临床诊断上的应用也越来越广泛。


    操作规程

    通电预热

    将电源接通和开关打开,恒温室温度显示应当显示室温值,按下温度预热,预热20min之后,恒温室在恒温状态。


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    杂交管安装

    旋转门锁,将玻璃门打开,向下点动旋转、步进开关、将杂交支架旋转到合适的位置,在旋转支架卡紧杂交管,将玻璃门关闭和锁紧。


    启动旋转支架

    向上接通旋转、步进开关、转动杂交支架,开始杂交反应。


    反应完成

    完成杂交反应之后,关断旋转、步进开关、旋转门锁,使玻璃门打开,将杂交管取出,如果此时,杂交管处于不合适的位置,可向下点动旋转、步进开关、将旋转支架调整到合适的位置,方便将杂交管取出。


    将电源开关关闭


    注意事项

    1.在进行同位素标记的杂交实验时,必须对杂交管的密封情况进行检查,防止引起污染。如果发生污染,需要将情况及时汇报给有关部门的使用人员和检修人员,使不必要的伤害尽可能的减少。


    2.因为分子杂交仪具有紧凑的结构和较高的密封性要求高,因此,当仪器运行中有故障出现,应当将电源切断,及时告知专业技术人员。


    3.电源插座的接触良好。


    4.当接触在高温状态时,对杂交管进行装取,留心,不要烫伤。


    5.在装入反应液前,需要保持杂交管清洁,在将反应液和反应膜装入后,必须将瓶盖拧紧,防止漏液。


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